Táirgí

Rinneadh staidéar ar topology membrane an fhearainn cainéal E1 colicin trí aistriú fuinnimh athshondais fhluaraiseachta (FRET).Bhain an FRET le aimínaigéad fluaraiseacha (coumarin) a bhí ionchódaithe go géiniteach mar dheontóir agus iarmhar cistéin a bhí lipéadaithe go roghnach ceangailte le DABMI (4-(démheitiolaimín) feinileazophenyl-4'-maleimide) mar ghlacadóir FRET.Ionchorpraíodh an t-iarmhar fluaraiseacha coumarin isteach sa phróitéin trí phéire sintéise tRNA/aminoacyl-tRNA orthogonal a cheadaigh ionchorprú roghnaíoch in aon suíomh laistigh d'fhearann ​​an chainéil colicin.Bhí sóchán stad (TAG) le haghaidh ionchorprú cúmarin agus sóchán cistéin (TGT) le haghaidh ceangaltán DABMI i gceist le gach aon mhalairt.Cinneadh sé achar idirheliach laistigh de héilí 1-6 ag baint úsáide as anailís FRET do na stáit intuaslagtha agus membrane-cheangailte.Thaispeáin sonraí FRET athruithe móra ar na hachair idirhelicacha i measc Helices 3-6 tar éis comhlachas membrane a sholáthair léargas nua ar struchtúr an fhearainn cainéil faoi cheangal scannáin.Go ginearálta, tháinig laghdú ar éifeachtúlachtaí idirhelicacha coumarin-DABMI FRET nuair a bhí an membrane ceangailteach, ag tógáil ar an scáthshamhail don chainéal coilín.Forbraíodh samhail trialach do staid dhúnta an fhearainn chainéil bunaithe ar shonraí FRET reatha agus a foilsíodh roimhe seo.Molann an tsamhail socrú ciorclach de helices 1-7 ar deiseal ón taobh extracellular agus comhlachas interfacial membrane de héilí 1, 6, 7, agus 10 timpeall an hairpin trasmembrane lárnach déanta ag helices 8 agus 9.