Táirgí

Chun roinnt meitibilítí de 5-fluorouracil (5-FU) agus dhá núicléatídí monophosphate ingenous a chainníochtú go sonrach, d'fhorbraíomar modh bunaidh bunaithe ar mhais-speictriméadracht crómatagrafaíochta leachtach (LC-MS/MS).Cheadaigh an measúnú seo na nithe seo a leanas a chinneadh: (i) táirgeadh infhéitheach 5-fluara-2′-déocsiúirín-5′-monafosfáit (5-FdUMP) ó 5-Fu nó 5-fluara-2′-déocsiridinín (5-FdUrd) , (ii) an tionchar atá ag tiúchan 5-FdUMP ar an gcóimheas infhéitheach 2′-déocsiridine-5′-monafosfáit (dUMP)/thyimín-5′-monafosfáit (TMP), agus (iii) méid an tseolta de 5-FdUMP agus 5-FU ó chealla saothraithe daonna ag iompróirí ABC.Faoi ár gcoinníollacha turgnamhacha, goraíodh cealla le 5-FU nó 5-FUrd.Ansin, bhí meatánól deasctha próitéiní ceallacha.Chuir an nós imeachta seo aisghabháil ard-eastóscadh ar fáil.Ina theannta sin, chun secretion 5-FU agus 5-FdUMP ó chealla a thomhas, rinneamar cainníochtú ar na móilíní seo i meán cultúir.Cuireadh na meáin instealladh go díreach (5-FU) nó rinneadh eastóscadh céim soladach orthu ag baint úsáide as cartús eastósctha Céir Oasis (5-FdUMP).Rinneadh anailítí a scaradh ar cholún dC18 Atlantis 3.5 μm, (100 mm × 2.1 mm id) le modh isocratach ag baint úsáide as maolán formate amóiniam / meatánól / uisce (5/5/90, v/v) mar chéim shoghluaiste.Níor sháraigh an t-am reáchtála 6.2 min.Rinneadh na hanailítí a ianú i gcomhéadan leictreaspray faoi mhodh ian diúltach.Rinneamar an modh a bhailíochtú thar raon 2.5-150 ng ml −1 de réir na gcomhdhúile.Bhí an inathraitheacht laistigh agus idir-mheasúnaithe níos ísle ná 10% thar seacht lá.Bhí na comhdhúile go léir cobhsaí i gcealla nó i meán cultúir nuair a stóráladh samplaí ag −20 ° C ar feadh dhá sheachtain ar a laghad, agus tar éis trí thimthriall reoite-leá.Níor breathnaíodh aon éifeacht maitrís sa dá mheán.