Táirgí

Is mórdhúshlán anailíseach fós é an anailís ar imeachtaí fosfarylation ar fud an phróitéin mar gheall ar chastacht ollmhór na ngréasán fosfarylation próitéine.San obair seo, déanaimid measúnú ar chomhlántacht Lys-N, Lys-C, agus trypsin maidir lena gcumas cur leis an anailís dhomhanda ar an bhfosfópróitéam.Baineadh úsáid as leagan scagtha de mhalartán láidir calaithe íseal-pH chun peiptídí N-aicéitilithe, fosfarlaithe agus neamh-mhodhnaithe a scaradh go héifeachtach.D'fhéadfaí iomlán de 5036 fosfapeiptíde neamhiomarcaithe a aithint le ráta fionnachtana bréagach de <1% ó 1 mg de phróitéin ag baint úsáide as meascán de na trí einsímí.Thug ár sonraí le fios go raibh an forluí idir na tacair sonraí fosfapeiptíde a gineadh le próitéasanna éagsúla imeallach, ach fuarthas go raibh an forluí idir dhá thacar sonraí tryiptigh a gineadh den chineál céanna ar a laghad 4 huaire níos airde.Ar an mbealach seo, d'fhág úsáid chomhthreomhar Lys-N agus trypsin méadú 72% ar líon na bhfosfapeiptíde braite i gcomparáid le d le trypsin amháin, ach níor tháinig méadú 25% ar thurgnamh macasamhail trypsin.Mar sin, agus sinn ag díriú ar shonraí trypsin agus Lys-N amháin, d’aithníomar 4671 fosfapeiptíde nach raibh iomarcach.Léirigh anailís bhreise ar na suíomhanna braite gur saibhríodh tacair sonraí Lys-N agus trypsin i móitífeanna fosfarylation a bhí an-difriúil, rud a léiríonn tuilleadh go bhfuil cur chuige ilpróitéine an-luachmhar in anailísí fosfaipróitéamaí.